腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（AGP）活性检测试剂盒
（紫外分光光度法）
产品货号：BA
产品规格：25管/24样
产品内容：
提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存;试剂一：液体10mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前每支加入4mL双蒸水充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入3mL双蒸水充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存；试剂四：粉剂×1支，-20℃保存；临用前每支加入μL双蒸水充分溶解备用；用不完的试剂-20℃保存；试剂五：液体μL×2支，-20℃保存；产品说明：
AGP(EC2.7.7.21)主要存在于植物中，催化葡萄糖-1-磷酸（G1P）与ATP反应生成淀粉合成的直接前体ADPG，是植物淀粉生物合成的主要限速步骤。AGP催化的逆向反应生成G1P，在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，nm下测定NADPH增加速率，即可计算AGP活性。需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。操作步骤：
一、粗酶液提取：
称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。二、测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
2、在EP管中按顺序加入下列试剂（如果一次性测定样本较多，可以将试剂一、二按比例配成混合液1，将试剂一、三、四和五按比例配成混合液2）
混匀后立即在nm波长下记录初始吸光度A1和2min后的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。
三、AGP活性计算
1、按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生1nmolNADPH定义为一个酶活性单位。
AGP活性（U/mgprot）＝ΔA÷（ε×d）×V反总÷T÷（Cpr×V样本）
=×ΔA÷Cpr。此法需要自行测定粗酶液蛋白质浓度。
2、按照样本鲜重计算
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟催化产生1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。
AGP活性（U/g鲜重）＝ΔA÷（ε×d）×V反总÷T÷（W×V样本÷V提取）
=×ΔA÷W。T：反应时间，2min；ε：NADPH消光系数，6.22×10-3mL·nmol-1·cm-1；V反总：反应总体积，0.71mL；d:石英比色皿光程，1cm；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；V样本：加入的样本体积，0.02mL；V提取：加入的提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g。