土壤酸性转化酶（S-AI）活性检测（微量法）
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
产品货号：BA
产品规格：管/48样
产品简介：
S-AI在pH为4.5~5.0（酸性）条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是土壤微生物蔗糖代谢关键酶之一。
S-AI催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在nm有特征光吸收，在一定范围内nm光吸收增加速率与AI活性成正比。
产品内容：
试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL试剂一充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1支，4℃保存，10mg无水葡萄糖。临用前加入1mL试剂一溶解,制备10mg/mL葡萄糖标准液备用。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水、50目筛（或更小）、甲苯。
操作步骤：
一、样品处理：
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
二、测定步骤及加样表：
1、分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至nm，蒸馏水调零。
2、标准液的稀释：将10mg/mL葡萄糖标准液用试剂一稀释至0.4、0.3、0.2、0.1、0.08、0.06mg/mL
的葡萄糖标准溶液备用。
3、加样表：
混匀，煮沸10min左右（盖紧，以防止水分流失），流水冷却后充分混匀，nm处蒸馏水调零，记录各管吸光值A，记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算ΔA=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。
三、S-AI活性计算：
1、标准曲线的绘制：
以葡萄糖浓度为x轴，相应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b；将ΔA带入公式得到x（mg/mL）
2、S-AI活性计算
单位定义：37℃每g土壤每天产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
S-AI（U/g）=x×V酶促÷W÷T×5=19.68×x÷W。
V酶促：酶促反应总体积，0.mL；W：样本鲜重，g；T：反应时间：1/24d；5：上清液稀释倍数
注意事项：
1、如果加入试剂三，煮沸10min后有混浊物出现，建议离心除去沉淀（00rpm，2min），取上清测定吸光度；
2、如果吸光值大于1，可以将上清液再进行稀释；若吸光值较小，可以减少上清液稀释倍数。两种操作均要注意改变公式中的稀释倍数。