植物硝态氮含量检测试剂盒(货号:AKPL)
氮在植物的生长和发育过程中起着极其重要的作用,硝酸盐是植物吸收的主要含氮物质之一,不仅是植物从土壤中吸收的重要无机氮素形式,也是植物体内转移的主要氮素形式,作为高等植物重要的氮素营养,直接影响植物的生长,测定植物体内硝态氮含量变化对了解氮代谢机制具有重要的意义。
NO在浓酸条件下能够与水杨酸反应生成硝基水杨酸,产物在碱性条件下呈黄色,在nm处具有特征吸收峰,通过吸光值变化即可定量检测硝态氮的含量。
植物硝态氮含量检测原理标准稀释液的制备:将μg/mLNO3-N标准液使用蒸馏水稀释至60、40、20、10、5、2.5μg/mL即为标准稀释液。
需自备试剂:浓硫酸(HSO,MW=98.,CAS:-93-9)
测定过程中所需要的仪器和试剂:可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴、浓硫酸和蒸馏水。
1.植物样品的处理(可根据预实验结果适当调整样本量及比例)
按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:(5-10)的比例(建议称取0.1g组织,加入1mL蒸馏水)处理样品,室温匀浆后置于90℃恒温水浴中浸提30min(密封以防止水分散失,期间不断颠倒混匀),冷至室温后,g常温离心15min,取上清即为待测样本。
注:含色素样本需在室温匀浆后加入约3mg试剂三后再进行后续提取。
吸光值测定:取1mL反应液置于1mL玻璃比色皿中,测定nm处吸光值,记为A测定、A对照、A标准和A空白;计算ΔA测定=A测定-A对照,ΔA标准=A标准-A空白。注:空白管只需测定1-2次,每个测定管均需设一个对照管。
标准曲线的建立:以60、40、20、10、5、2.5μg/mL为横坐标(x),以其对应的A标准为纵坐标(y),绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将A测定带入公式中得到x(μg/mL)。
注意事项
①试剂一和试剂二具有强腐蚀性,操作时注意做好防护措施;
②试剂一配置后保质期较短,为便于安排实验时间,附带一瓶试剂一作为备用(每瓶均可完成至少25个样本的测定),可根据实际情况现用现配;
③若A测定超出标准吸光值线性范围:高于最高值建议将待测样本使用蒸馏水适当稀释后再进行测定;低于最低值建议适当增加样本量重新提取后再进行测定,计算时相应修改;
④为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
ForResearchUseOnly.NotforUseinDiagnosticProcedures.