草酸含量检测试剂盒靛酚蓝比色法

草酸(OA)含量检测试剂盒(货号:AKAC)

一、产品描述

草酸是植物体内普遍存在的一种二元羧酸,其作为矿物元素的拮抗物,长期食用草酸含量高的蔬菜,容易引发关节炎、低血钙和肾结石等疾病,并且可作为制药原料、络合剂、漂白剂、沉淀剂以及还原剂,在医药、印染和塑料等工业领域具有广泛应用。

Fe3+在pH为2的条件下能够与磺基水杨酸反应生成紫色络合物,产物在nm处具有特征吸收峰,草酸和草酸根能够使Fe3+与磺基水杨酸的紫色络合物颜色变浅,Fe3+与磺基水杨酸络合物的吸光值随着草酸量的增加而降低,根据吸光值的变化即可定量检测草酸的含量。

草酸含量检测原理

二、产品内容

三、产品使用说明

测定过程中所需要的仪器和试剂:可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。

1.样品处理(可根据预实验结果适当调整样本量)

①按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:(5-10)的比例(建议称取0.1g组织,加入1mL蒸馏水)处理样品,冰浴匀浆;

②加入3-5mg试剂一,充分振荡混匀,75℃水浴脱色30min(密封以防止水分散失),期间颠倒混匀2-3次,脱色完成后rpm常温离心15min,取上清即为待测样本,置于冰上待测。

注:若沉淀无法完全沉降时,可多次离心以完全去除;若一次脱色不完全,建议重复脱色至溶液呈无色或乳白色。

2.测定步骤

①分光光度计预热30min以上,调节波长至nm,蒸馏水调零。

②在离心管中依次加入下列试剂:

吸光值测定:将反应液置于1mL玻璃比色皿中,测定nm处吸光值,记为A测定、A标准和A空白;计算A测定=A测定-A空白,A标准=A标准-A空白。注:空白管只需测定1-2次。

标准曲线的建立:以25、20、10、5、2.5、1.25mol/mL标准稀释液浓度为横坐标(x),以其对应的A标准为纵坐标(y),得到标准方程y=kx+b,将A测定带入公式中得到x(mol/mL)。

3.草酸(OA)含量计算

草酸含量(mg/g)==

注释:V提:待测样本总体积,1mL;M:草酸分子质量,90.04;W:样本质量,g;10-3:单位换算系数,1μg=10-3mg。

四、注意事项

①若测定吸光值超出标准线性吸光值范围:可以增加样本量或将待测样本适当稀释后再进行测定,计算时相应修改;

②可根据使用量将试剂二:试剂三:试剂四=2:15:1的体积比配置为OA工作液(现用现配),反应体系为:50μL待测样本+μL工作液+μL蒸馏水,充分混匀后进行后续测定;

③为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。

ForResearchUseOnly.NotforUseinDiagnosticProcedures.




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