总酸是指最终能释放出的氢离子数量,是一个定数。实验过程中我们常通过滴定法来测定植物中总酸的含量,具体操作流程如下:
一、试剂1.10.1mol/L氢氧化钠标准液:取10g分析纯氢氧化钠,溶于ml蒸馏水中(事先煮沸,去除其中CO2),贮于塑料瓶中,放置数日。用时取上清ml,加4倍去CO2水稀释,并用邻苯二甲酸钠标定。
0.1mol/L氢氧化钠标准液的效价(f)=10m/0.V
式中:
m为邻苯二甲酸氢钠的质量(g);
V为NaOH体积(ml)
1.21%试剂:称取1g酚酞,溶于ml95%乙醇中。
二、主要仪器万分之一分析天平
三、试样的制备鲜样混匀后置于4℃保存。
四、分析步骤4.1试样溶液制备
称取新鲜植物组织5g,置于研钵中,加少量石英砂研磨成匀浆,用蒸馏水洗入50ml三角瓶中,加蒸馏水约30ml,置于80℃恒温水浴中浸提30min,期间搅拌数次。取出冷却,过滤入50ml容量瓶中,并用蒸馏水冲洗残渣2~3次,合并滤液,用蒸馏水定容至50ml,充分混匀待测。
4.2样品测定
根据预测有机酸的含量,决定提取液的稀释浓度。用移液管吸取5~10ml样品提取液于50ml三角瓶中,加入酚酞指示剂3~5滴,用0.1mol/L氢氧化钠标准液滴定至出现微红色,30s不褪色为滴定终点,记录所消耗溶液的体积,重复3次,取平均值。
五、结果计算式中:
C——氢氧化钠标准液浓度(mol/L);
V1——滴定时所消耗的氢氧化钠标准溶液的体积(ml);
K——换算为某种酸克数的系数
VT——试样浸提后定容体积(ml);
m——试样质量(g);
VS——吸取滴定用的样液体积。
所得结果应保留小数点后三位。
来源:栢晖生物整理