摘要：目的采用代谢组学技术观察附子AconitiLateralisRadixPraeparata对小鼠血清内源性代谢物的影响，寻找其相关生物标志物和可能表征附子临床治疗作用的代谢途径及相关靶点，探讨其发挥疗效的分子机制。方法将20只雄性小鼠随机分为2组，分别ig附子水煎液和蒸馏水，小鼠给药量为15mL/(kg?d)，连续ig4d；采集各组血样，利用UPLC-MS/MS技术进行分析，主成分分析（PCA）、偏最小二乘判别分析（PLS-DA）等分析方法进行数据模式识别，并根据变异权重系数（VIP）大于1和手动积分计算筛选出差异代谢物；利用差异代谢物进行通路分析；运用Cytoscape和MetScape对差异代谢物进行网络模块化分析并筛选靶标。结果通过数据模式识别，附子组与对照组均能完全分离；共筛选出18个差异代谢物，其含量都呈上调趋势；通过通路分析，得出5条相关通路，分别为亚油酸代谢、花生四烯酸代谢、淀粉和蔗糖代谢、烟酸和烟酰胺代谢和磷酸肌醇代谢通路；网络模块化分析共得到14个模块，其中最大的2个模块是花生四烯酸代谢通路和亚油酸代谢通路；在整个网络中，花生四烯酸（59）、亚油酸（55）、烟酰胺（26）和棕榈酸（11）节点度值大于均值（8.），涉及的通路分别为花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、烟酸和烟酰胺代谢和饱和脂肪酸β-氧化通路；共筛选出26个相关基因，同属于细胞色素P（CYP）酶系。结论附子可能通过作用于CYP，影响花生四烯酸代谢等途径，进而调节机体能量代谢，从而发挥临床治疗作用。
附子为毛茛科植物乌头AconitumcarmichaeliDebx的侧根，性热、味辛，首载于《神农本草经》，具有回阳、逐冷、祛风湿等作用，是临床常用中药，主要用于大汗亡阳、四肢厥逆、霍乱转筋、肾阳衰弱的腰膝冷痛、形寒爱冷、精神不振以及风寒湿痛、脚气等病症的治疗。近年的现代研究发现其对心血管疾病的治疗作用显著、疗效明确，但其确切的分子作用机制目前尚未得以揭示[1-2]。代谢组学是从整体上对生物机体内代谢物的动态变化进行分析研究的现代生物学分析技术[3]，与中药多组分、多靶点、多效应的作用特点和整合作用的治疗特征不谋而合，是研究中药对机体产生变化的重要现代化手段。本实验在以往对辛热中药药性、药效评价的基础上，利用UPLC-MS/MS组学技术分析典型的热性中药附子干预小鼠后的内源性血清代谢物变化，寻找可能表征附子性效相关的代谢途径及相关靶点，进而阐释其治疗心血管疾病可能的分子机制。
1材料
1.1药材
附子饮片购买于北京同仁堂，经中国中医科学院中药研究所生药室鉴定为毛莨科植物乌头AconitumcarmichaeliiDebx.子根的加工品，符合《中国药典》年版的相关规定。
1.2仪器与试剂
DIONEXUltimate超高效液相色谱仪（ThemoFisher公司）；ThermoQEXACTIVE质谱仪（ThemoFisher公司）；C18色谱柱（mm×2.1mm，1.7μm，ThermoSyncronis公司）；BSAS型电子分析天平（北京赛多利斯科学仪器有限公司）；Milli-QAdvantageA10型超纯水仪（Millipore公司）；电子天平（MettlerToledo公司）；DW-HL型?80℃超低温冰箱（中科美菱低温科技有限责任公司）；BCD-D11D型冰箱（信科龙电器股份有限公司）；型冷冻离心机（Eppendorf公司）；KQ-超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；甲醇（色谱级，批号）、乙腈（色谱级，批号）、甲酸（色谱级，批号）、甲酸铵（色谱级，批号）均购于ThemoFisher公司；超纯水（屈臣氏集团）。
1.3实验动物
雄性昆明小鼠20只，体质量为18～22g，购买于军事医学科学院。动物许可证号为SCXK-（军）-。实验小鼠适应性饲养7d后进行正式实验。
1.4数据库及软件
Metlin[4]数据库（