1.取2克材料,洗涤并切碎,放入研钵中,然后放入低温冰箱中冷冻30分钟。取出并在冰浴中添加少量石英砂和提取缓冲液(每克鲜重分别以1ml,2ml和4ml两次添加玉米,小麦和大米)。研磨成匀浆,在低温下离心5分钟(r/min)。上清液是粗酶提取物。以上操作应尽可能在冰浴中进行。2.将0.4ml粗酶提取物,1.2ml0.1mol/LKNO3磷酸盐缓冲液,0.4mlNADH2溶液倒入准备好的带刻度的试管中,并充分混合,在30℃孵育30分钟,不添加NADH2。对照,取0.4ml蒸馏水代替。3.孵育后,立即添加1ml对氨基苯磺酸溶液以终止反应,添加1mlα-萘胺溶液,显色20分钟,在台式离心机上离心10分钟,然后测量上清液在分光光度计上在nm波长处。4.标准曲线制作和结果计算与体内方法相同。