胰蛋白酶活性检测试剂盒（货号：AKPR）
胰蛋白酶（Trypsase）是一种丝氨酸蛋白酶，能够选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或精氨酸羧基所构成的肽链，作为一种重要消化酶，在食品、制药、皮革、纺织、化妆品、畜牧、医疗和生物研究等领域具有广泛应用。
胰蛋白酶能够催化N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（N-Benzoyl-L-Arginine-Ethylester，BAEE）中酯键水解，生成N-苯甲酰-L-精氨酸（N-Benzoyl-L-Arginine，BA），产物在nm处具有特征吸收峰，通过吸光值的变化即可表征胰蛋白酶的活性。
测定过程中所需要的仪器和试剂：紫外分光光度计、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。
1.粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）
①组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃g离心10min，取上清即为粗酶液，置于冰上待测。
②酶制剂：称取1mg酶制剂样品，加入1mL提取液，充分混匀后置冰上待测（为保证实验的准确性建议梯度稀释后再进行测定）。
2.测定步骤
①紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
吸光值测定：①迅速混匀并开始计时，测定nm处初始吸光值，记为A1测定和A1空白；②测定60s时nm处吸光值，记为A2测定和A2空白；③计算A测定=A2测定-A1测定，A空白=A2空白-A1空白，A=A测定-A空白。注：空白管只需测定1-2次。
注意事项
①建议调整样本量或稀释程度将吸光值变化控制在0.01-0.15之间，可提高检测精准度；
②若A测定为负值，建议将试剂一适当稀释（2-5倍）后再进行实验；
③准确在0s和60s处完成读数，以保证实验结果的准确性；
④为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。
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