植物原花青素含量检测试剂盒盐酸香草醛法

植物原花青素含量检测试剂盒(货号:AKPL)

原花色素(OPC)是一类能够在酸性条件下生成花青素的多酚化合物,广泛存在于植物的各种器官中,多以儿茶素或表儿茶素聚合而成,作为植物次生代谢产物具有极强的抗氧化性和自由基清除能力,可作为无毒、不至敏、安全性高的抗氧化剂,在医药、食品、化妆品和保健品领域具有广泛应用。

植物原花青素A环上的间苯二酚或间苯三酚在酸性条件下能够与香草醛发生缩合反应,产物在nm处具有特征吸收峰,通过吸收值的变化即可定量检测植物原花青素的含量。

植物原花青素检测原理

测定过程中所需要的仪器和试剂:可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱、烘箱、30-50目筛和蒸馏水。

1.原花色素(OPC)的提取(可根据预实验结果适当调整样本量及比例)

①预处理:将样本烘干至恒重,粉碎后过30-50目筛,称取0.1g样本,加入1mL提取液;

②超声提取:功率W,超声5s,间歇8s,总时间30min;rpm常温离心10min,取上清即为待测样本。

2.测定步骤

①分光光度计预热30min以上,调节波长至nm,蒸馏水调零。

②OPC工作液的制备(现用现配):根据使用量按试剂一:试剂三=1:1的体积比混合均匀。

吸光值测定:立即测定nm处吸光值,记为A测定、A对照、A标准和A空白;计算A测定=A测定-A对照,A标准=A标准-A空白。注:每个测定管均需设一个对照管,空白管只需测定1-2次。

标准曲线的建立:以5.0、4.0、2.0、1.0、0.5、0.25mg/mL为横坐标(x),以其对应的A标准为纵坐标(y),绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将A测定带入公式中得到x(mg/mL)。

注意事项

①若测定吸光值超出标准线性吸光范围:高于标准上限可将待测样本使用提取液适当稀释或减少样本量后再进行测定;低于标准下限建议适当增加样本后再进行测定,计算时相应修改;

②为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。

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