移液器使用与维护标准操作规程1.目的：确保移液的精确性，正确使用移液器。保证移液器加量的准确性。2.适用范围：本实验室使用的可调式移液器。3.负责人:4.移液器的使用：4.1设定容量值：a.根据所需取液量选择相应的加样器；可调式加样器应在允许的范围内yxq调节；连续可调式加样器容量读数由三位拨号数字组成（显示所转移液体容量），读数时从上（最大有效数字）到下（最小有效数字）读取，利用底部刻度可将容量调节到更精确度的分度。b.转动加样器的调节旋钮，反时针yxq方向转动旋钮，可提高设定移液量；顺时针方向转动旋钮，可降低设定移液量。用调节旋钮设定容量比较方便。在调整旋钮时，不要用力过猛，并应注意使移液器显示的数值不超过其可调范围。c.本室所使用Finnpipette加样器是连续可调、计量和移液的专用仪器。加样器有各种不同的型号，推杆上F左下角yxq数字区间为加样器最小—最大容量值，容量范围自0.5ul至ul（各种型号容量范围见下行括号内）。(0.5—10ul)（10-50ul）(5—50ul)(20—ul)（50-ul)(—ul)4.2吸液和放液：首先选择一支合适的吸管安放在加样器套筒上。稍加扭转压紧吸头使之与套筒间无空气间隙。未装吸管的加样器绝不可用来吸取任何液体。最常用的吸液和放液方式有两种。4.2.1前进式：a.吸液：把按扭压至第一停位点；垂直握持加样器,使吸管头浸入液面以下1cm深度然后缓慢、平稳地松开按钮吸入液样，待移液器吸满液体后等一秒钟，然后将吸管头提离液面，贴壁停留2-3秒，使管尖外侧的液滴滑落。b.放液:将吸头口贴到容器内壁并保持10°～40°yxq倾斜。平稳地把按钮压到第一停点,放出液体，等1-2秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余液体。压住按钮,停顿1-2秒，提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。松开按钮。按吸管推顶杆去除吸管。此种加样方式适合加样本时使用。4.2.2倒退式：a.吸液：把按扭压至第二停点；垂直握持加样器,使吸头浸入液样中,然后缓慢平稳地松开按钮吸入液样，吸满液体后，将吸头撤出液面，贴壁停留2-3秒，使管尖滴滑落。b.放液:将吸头口贴到容器内壁并保持10°～40°倾斜。平稳地yxq把按钮压到第一停点,放出预设定液体。遗留在管嘴尖的液体随吸嘴一起扔掉或按至第二点压回到原来液体管中。c.此种方式适用于高粘度液体；易起泡沫的液体或极小量的液体4.2.3重复操作法：重复操作移液法可以快速、简便地重复转移同体积的同种液体。a.将操作按钮向下压至第二停点位置。b.将移液管管嘴浸入液面下2～3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。c.轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。待放完所需体积液体后，把按钮停在第一停点位置，不包括在移液量之内的少量yxq液体仍留在管嘴内，管嘴外的液滴则需包括在移液量之内。d.重复步骤b.和c.继续移液操作，就可重复转移相同体积液体。4.3预洗：a.当取液体积大于10ul时，为了保证吸液的精确度和准确性，在装上一个新吸嘴（或改变吸取的容量值）后应预洗吸嘴，即先吸入一次液样并将之排回原容器中，反复2-3次。预洗新吸头能有效提高移液的精确度和重现性。这是因为第一次吸取的液体会在吸嘴内壁形成液膜，导致计量误差。而同一吸嘴在连续操作时液膜相对保持不变，故第二次吸液时误差即可消除。b.而当yxq液体体积小于10ul，只有在没有预洗，同时要将吸取的液体在要转入的液体中反复吸打几次，排空液体，再将吸嘴提出并贴壁停留1-2秒，才能保证取液的精确度和准确性。4.4致密及粘稠液体：吸取或排放血清或粘稠液体时，宜在第一点多等一两秒钟再压到第二点。4.5加样器吸头：加样的准确性与精密度与加样器的吸嘴的质量也密切相关，吸嘴的选择也至关重要。基因扩增实验因为要使用大量的吸嘴，并有许多微量操作，因此在选择时应注意以下几点：a.生产过程纯净，符合当今无染料物质的要求（避免污染）。b.形状（密封良好的环口、薄壁和嘴口尖细）使安装或卸脱更加容易、管壁有弹性、不会产生漩涡，从而精度更高。c.嘴口决无毛刺。吸嘴表面光洁平滑，沾湿性极小，避免液体留外壁引起的误差。dyxq.每个嘴口上都有模具编号，确保品质跟踪系统。e.吸嘴与吸嘴套筒密封完好，防止空气泄漏造成精度或准确度的误差。f.有液体容量刻度线，这样吸液量不够可以及时发现。g.可在℃下消毒20分钟。h.应选用带虑芯的吸头，以避免样品与样品、样品与加样器或样品与操作人员的污染。4.6故障排除：a.发现漏气或计量不准，其可能原因和解决方法为：①套筒松动？用手拧紧螺帽。②套筒括花或破裂？卸下弹射器，检查套筒。③活塞或密封受化学腐蚀？更换活塞或密封圈。用蒸馏水洗涤套内壁b.发现套筒内有液体可依下法清洁：卸下弹射器，拧下螺帽并用蒸馏水洗涤套筒、活塞、密封圈及O形环，待完全干燥后重新组装。c.需要时，雷勃加样器的吸管部分及套筒、螺帽和弹射器在℃及1巴压力下消毒20分钟。注意密封圈及O形环不能高温消毒。d.发现吸液时有气泡：先将液体排回原容器，检查吸嘴浸入是否合适，再更慢地吸取液体；如仍有气泡应更换吸嘴。4.7凡是更换了活塞或操纵杆的加样器需进行全面调校。4.8加样器使用注意事项：4.8.1根据所需取液量选择相应的移液器及吸嘴，基因扩增实验要求使用带虑心的吸嘴，防止污染。4.8.2取液时应缓慢匀速吸取，避免液体浅到移液器头yxq上；打出液体后拇指不应松开按钮，将吸嘴压掉后再将拇指松开，避免液体回吸。4.8.3调整取液量的按钮时，不要用力过猛，并应注意计数器显示的数值不要超过其可调范围。4.8.4连续可调移液器在取样加样过中应注意移液嘴不能触及其它物品，以免被污染。吸头盒（架子）、废液瓶、所取试剂及移液的标本管应摆放合理，以方便操作过程、避免污染为原则。4.8.5连续可调移液器在使用完毕后应置于移液器架上，远离潮湿及腐蚀性物品。连续可调移液器不可在无吸嘴时使用，吸嘴有液体时不能平放或倒置。以防液体进入移液器套筒内。4.8.6在取液之前，所取液体应在室温（15-C）平衡；液体温度与室温有异时，将吸嘴预洗多次再用；移液温度不得超过C。4.8.7操作时要慢和稳，吸嘴浸入液体深度要合适，吸液过程尽量保持不变；改吸不同的液体、样本或试剂前要更换新吸嘴；发现吸嘴内有残液时必须更换；新吸嘴使用前应先预洗。4.8.8为防止液体进入移液器套筒内，应注意以下几点：压放按钮时保持平稳；移液器不得倒转；吸嘴有液体时不得平放。4.8.9切勿用油脂等润滑活塞或密封圈。4.8.10不可把容量调到超过其适用范围。4.8.11使用了酸或有腐蚀性蒸汽的溶液后，最好拆下套筒，用蒸馏水清洗活塞及密封圈。4.9移液器的维护：每次对使用前后的移液器用75%酒精进行擦拭。每周1次对移液器咀进行75%酒精浸泡15分钟左右，若使yxq用过程中发生污染应随时浸泡处理。如有液体进入加样器内造成污染，可以将加样器拆开后进行清洁。各区加样器具有各区的标识，清洁时分别对待。4.10移液器的校准：为确保移液器加样的精确性和准确性，正确使用移液器，需定期（半年）对移液器进行校准，由设备科人yxq员送到当地计量部门进行校正，并保存好校正记录和校正移液器的编号。5.本标准操作程序的变动程序：可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室技术负责人，检验科主任。
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