sod活性检测试剂盒是一种用于定量检测生物样本中超氧化物歧化酶(SOD)活性的试剂盒。SOD是催化超氧阴离子歧化成O2和H2O2的酶,是抗暴露于O2的所有细胞中超氧化物自由基毒性的重要抗氧化剂。这种试剂盒可用于研究与SOD活性相关的疾病,如肌萎缩侧索硬化、围产期致死、神经紊乱和癌症等。
使用sod活性检测试剂盒时,需要按照试剂盒的说明书进行操作,包括样本准备、加样、孵育、终止反应等步骤。在检测过程中,需要使用适当的仪器设备,如分光光度计、离心机等。
需要注意的是,sod活性检测试剂盒的灵敏度和特异性可能会受到样本质量、操作流程和环境条件等因素的影响,因此需要仔细操作和记录每个步骤。此外,不同品牌和型号的试剂盒可能存在差异,因此需要根据具体情况选择适合的试剂盒。
样本处理:
1.细菌或培养细胞样本:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(个):提取液体积(mL)为-:1的比例(建议万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或W,超声3s,间隔10s,重复30次),g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2.组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆;g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清(浆)样本:直接检测。
测定步骤:
1.分光光度计预热30min以上,调节波长至nm,蒸馏水调零。
2.测定前将试剂一、三和五37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴5min以上。
3.样本测定(在EP管中加入下列试剂)
充分混匀,37℃水浴30min后,置于1mL玻璃比色皿测定nm下的吸光度,分别记为A测定、A对照、A空1、A空2,计算ΔA测定=A测定-A对照,ΔA空白=A空1-A空2。
注意:
1、样本和试剂二使用时在冰上放置。
2、样本较多时,可按表格配置工作液(包含试剂一、二、三),试剂五必须后加入。
3、空白管1和空白管2各只需做1~2管;每个样本有一个对照管。
4、反应完成后,可能有沉淀生成,混匀后测定即可。