土壤硝态氮含量检测试剂盒（货号：AKEN）
氮素是作物生长需求量和增产贡献率最大的营养元素，土壤中硝态氮指硝酸盐中所含有的氮元素，作为高等植物吸收氮的主要形式之一，其含量直接关系到作物的产量与品质，并且能够反映土壤短期氮素供应状况，对土壤中氮素营养的控制具有重要意义。
NO在浓酸条件下能够与水杨酸反应生成硝基水杨酸，在碱性条件下呈黄色，产物在nm处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可定量检测土壤硝态氮的含量。
土壤硝态氮含量检测原理需自备试剂：浓硫酸（HSO，MW=98.，CAS:-93-9）
测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴、振荡仪、浓硫酸和蒸馏水。
1.土壤样品的处理（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）
按照土壤样本质量（g）：蒸馏水体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1g土壤样本，加入1mL蒸馏水）处理样品，置于振荡仪中室温振荡提取1h，g常温离心10min，取上清即为待测样本。
注：风干处理土壤样本易造成硝态氮含量发生变化，建议使用新鲜未风干的土样，样品采集后应4℃密封储存，建议48h内完成检测；若无法及时测定，建议-20℃分装保存；测定时注意解冻时间：室温下需在4h内完成解冻和提取过程，4℃条件下需在48h内完成解冻和提取过程。
2.测定步骤
①分光光度计预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
②在离心管中依次加入下列试剂：
吸光值测定：取1mL反应液于1mL玻璃比色皿中，测定nm处吸光值，记为A测定、A标准和A空白，计算ΔA测定=A测定-A空白，ΔA标准=A标准-A空白。注：空白管只需测定1-2次。
标准曲线的建立：以60、40、20、10、5、2.5μg/mL为横坐标（x），以其对应的A标准为纵坐标（y），绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将A测定带入公式中得到x（μg/mL）。
注意事项
①试剂一配置后有效期较短，为便于试验安排，附赠一瓶作为备用（每瓶均可完成至少30个样本的测定）；
②土壤胶体不吸附硝酸根离子，易造成分布不均匀情况，因此测定多个样本或重复样本时注意保持相同的采样深度；
③若测定吸光值超出标准吸光值线性范围：高于最大值建议将待测样本使用蒸馏水适当稀释后再进行测定，低于最低值建议适当增加样本量后再进行测定，计算时相应修改；
④土壤经风干或者烘干很容易引起硝态氮含量的变化，所以建议采用新鲜土壤进行含量测定；
⑤样本间硝态氮含量进行比较时：因样本间水分含量不同，计算时需将样本间水分误差排除后再进行比较（另取相同质量土样烘干后以干重计算结果）；
⑥试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施；
⑦为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。
ForResearchUseOnly.NotforUseinDiagnosticProcedures.