土壤硝酸还原酶（S-NR）活性检测试剂盒（可见分光光度法）
产品货号：BA
产品规格：50管/24样
产品简介：
S-NR催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐，是土壤硝态氮还原的关键酶。研究S-NR的活性对合理施肥，降低氮素的损失具有重要意义。
T-NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3+NADH+H＋→NO2+NAD＋+H2O；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对–氨基苯磺酸及α-萘胺定量生成红色偶氮化合物；未反应的NADH会抑制后续的显色反应，用PMS将其中和后再进行后续反应；生成的红色偶氮化合物在nm有最大吸收峰，可用分光光度法测定。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
产品内容：
溶液的配制：
1.试剂五：如出现结晶析出，60℃水浴溶解后使用；
2.标准品：10μmol/mL亚硝酸钠。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、30-50目筛、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。
二、测定步骤：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
2.NaNO2标准液的配制：用蒸馏水将标准品稀释0.8、0.6、0.4、0.2、0.1μmol/mL。
3.样本测定：
混匀，显色20min后，nm下读取各管吸光值。计算ΔA测定=A测定-A对照，ΔA标准=A标准-A空白。
三、S-NR活性计算：
1.标准曲线绘制：
以0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mol/mL标准溶液为横坐标，ΔA标准为纵坐标绘制标准曲线，得到线性回归方程y=kx+b，将ΔA测定代入方程得到x（mol/mL）。
2.S-NR活性计算
单位的定义：每g土样每天中产生1molNO2的量为一个S-NR活力单位。
S-NR（U/g）=x×V标准÷W÷T=0.1x÷W
V标准：反应体系中加入的标准液体积，0.1mL；W：风干土样，g；T：反应时间，1d。
注意事项：
1.试剂一、试剂二和试剂四在冰上放置，用完立即放回-20℃。
2.每个测定管设一个对照管。
3.ΔA测定过小（小于0.01），可延长反应时间（37℃水浴时间）。
4.当ΔA大于1时，可以将上清液用蒸馏水稀释后，再进行测定，计算公式中乘以稀释倍数。