酸性土壤速效磷检测试剂盒（微量法）
产品货号：BA
产品规格：管/96样
产品简介：
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷、易矿化有机态磷以及某些已溶解的沉淀态磷酸盐，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。
用双酸法提取酸溶性磷和吸附态磷，钼蓝与磷酸根生成nm有特征吸收峰的物质，通过测定nm光吸收，即可计算磷含量。
产品组成：
溶液的配制：
1.试剂一：临用前加入5mL蒸馏水，溶解后4℃保存一周；
2.试剂二：临用前加入5mL蒸馏水，溶解后4℃保存一周；
3.标准品：10μmol/mL标准磷贮备液；
4.工作液（定磷剂）的配制：按H2O：试剂一：试剂二：试剂三=2:1:1:1的比例配制，配好的工作液应为浅黄色。若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，工作液应现配现用。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
技术指标：
最低检出限：0.μmol/mL
线性范围：0.-6μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、30-50目筛、漩涡震荡仪、研钵、EP管、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样风干，过30-50目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为1：10-20的比例（建议称取约0.05g土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，00g，25℃离心10min，取上清液待测。
二、测定步骤
1.分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
2.将10μmol/mL标准液用提取液稀释为3、2、1、0.5、0.25、0.、0.μmol/mL的标准溶液备用。
3.样本测定：(在1.5mL离心管中或96孔板依次加入下列试剂)
三、速效磷含量计算
1.标准曲线的绘制：
以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA带入方程得到x（μmol/mL）。
2.速效磷含量的计算：
速效磷含量（μmol/g质量）=x×V样÷（V样×W÷V样总）=x÷W
V样：加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g。
注意事项：
1.工作液（定磷剂）应现配现用，正常颜色为浅黄色，如有变色或变蓝则均为失效。
2.此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管或EP管等试验器材均要求严格无磷。
3.显色结束后应立即检测。
4.如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。