植物蔗糖含量检测试剂盒(微量法)
产品货号:BA
产品规格:管/96样
产品说明:
蔗糖是植物光合作用的主要产物,也是糖分运输和储藏的主要形式。因此,测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外,蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。先用碱与样本共热,破坏其中的还原糖。然后在酸性条件下将蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖进一步与间苯二酚反应,生成有色物质,在nm下有特征吸收峰。
技术指标:
最低检出限:0.mg/mL
线性范围:0.-12mg/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
产品内容:
溶液的配制:
试剂一:临用前加1mL蒸馏水溶解,用水稀释10倍,备用,即1mg/mL。
技术指标:
最低检出限:0.mg/mL
线性范围:0.-0.7mg/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
称取0.1样本,常温研碎,加入0.5mL提取液,适当研磨后快速转移到离心管中,置于80℃水浴锅中10min,振荡3~5次,冷却后,g,25℃离心10min,取上清,加入2mg试剂五,80℃脱色30min,再加入0.5mL提取液,g,25℃离心10min,取上清液测定。
二、测定步骤
1.可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至nm,蒸馏水调零。
2.样本测定(在1.5mLEP管中依次加入下列试剂):
混匀,沸水浴10min,冷却后取μL至微量玻璃比色皿或96孔板中测定nm处的吸光值,空白管、标准管和测定管分别记为A1、A2和A3。
三、蔗糖含量计算
1.按照样本蛋白浓度计算
蔗糖含量(mg/mgprot)=(C标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)=(A3-A1)÷(A2-A1)÷Cpr
此法需要自行测定蛋白浓度。
2.按照样本质量计算
蔗糖含量(mg/g质量)=(C标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
C标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
注意事项:
当样本吸光值大于1.4时,建议将样本用提取液稀释后进行测定。