氨苄青霉素
组分浓度:mg/ml氨苄青霉素
配制量:50ml
配制方法:
称取5gAmpicillin置于50ml塑料离心管中。
加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。
0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
卡那霉素
组分浓度:50mg/ml卡那霉素
配制量:50ml
配制方法:
称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。
0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
RNaseA
组分浓度:10mg/mlRNaseA
配制量:50ml
配制方法:
取0.5gRNaseA置于50ml塑料离心管中。
加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。
℃煮沸15min,缓慢冷却至室温,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
IPTG
组分浓度:24mg/mlIPTG
配制量:50ml
配制方法:
称取1.2gIPTG置于50ml塑料离心管中。
加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。
用0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
X-Gal
组分浓度:20mg/mlX-Gal
配制量:50ml
配制方法:
称取1gX-Gal置于50ml塑料离心管中。
加入40mlDMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解之后定容至50ml。
小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
DTT
组分浓度:1MDTT
配制量:10ml
配制方法:
称取1.54gDTT置于15ml塑料离心管中。
加入8ml的10mMNaAc(pH5.2),充分混合溶解之后定容至10ml。
用0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
EDTA溶液
组分浓度:0.5MEDTA
配制量:1L
配制方法:
称取.12gEDTA置于1L烧杯中。
加入ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。
用NaOH调节调节pH值至8.0(约20gNaOH),当pH接近8.0时,EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。
小份分装后,高温高压灭菌,室温保存
TAE
组分浓度:储存液50×,使用液1×
配制量:1L
配制方法(储存液50×):
Tris碱(g);
冰乙酸(57.1ml);
ml的0.5mol/LEDTA(pH8.0);
蒸馏水补足0ml。
TBE
组分浓度:储存液5×,使用液体0.5×
配制量:1L
配制方法(储存液5×):
Tris(54g);
硼酸(27.5g);
20ml的0.5mol/L的EDTA(pH8.0);
蒸馏水补足0ml。
PBS磷酸盐缓冲液
组分浓度:0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)
配置量:1L
配制方法:
称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于ml蒸馏水中。
用HCl调节溶液的pH值至7.4。
加蒸馏水定容至1L即可。
高压灭菌20min,室温或者4℃冰箱中保存。
蛋白酶K(proteinaseK)
组分浓度:20mg/ml
配制量:10ml
配制方法:
将mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解,不用涡旋混合。
加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
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