电生理实验你准备好了吗

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配置细胞电生理外液Heartinker

大家好!!继上篇文章的实验我们进行了后续的研究,为了探究细胞对各种预先选择的先导化合物的反应,我们将在下次实验进行细胞电生理。但在此之前,我们要配置细胞电生理外液(用于孵育、灌流或记录细胞和组织的电现象或电特性)。

???1.配药实验步骤

1.1在根据配药表准备好所需的药物后,我们要根据配药表上的量来进行称重。称重之前,要先在称量仪中心放入称量纸,之后再把称量仪归零。(不然称量仪会把称量纸的质量算进去,造成误差)。

1.2归零后,开始向称量仪中心加入药品。如果对药品的重量没有模糊的定义,最好从少量开始往大量加。具体步骤为:选择合适大小的药匙,用卫生纸擦干净(避免在测量一种药物时混入其它药物)。打开药瓶,用药匙取出一小勺然后放在测量仪中心,然后根据仪表盘上的数字添加或减少药物(尽量避免减少,因为从药瓶中的药物一旦拿出来就不能再放回,浪费的都是钱。

1.3在重量较为准确时关上测量仪的窗子。等待指数稳定后,如果不准确,继续调整;如果准确,拿出铺满药物的称量纸,小心翼翼的放入烧杯中。

2.溶药实验步骤

待溶剂被充分溶解并搅匀后,根据酸度计我们得知酸度略高于所需。因此决定加入氢氧化钠溶液来降低溶液pH值至7.2。具体步骤为使用移液枪依次加入适量NaOH溶液。

这是我们的操作~

3.定容实验步骤

把溶液从烧杯倒入容量瓶。使用三蒸水(蒸馏了三次的水)润洗烧杯两到三次,确保无溶液残留,再持续添加三蒸水至刻度线(需要通过看凹面确定)。之后持续添加三蒸水至刻度线之后来回颠倒容量瓶,使溶液充分混匀。

4.过滤实验步骤

使用0.22微米滤网。用镊子取出滤膜,放到抽滤漏斗中间,白色面向上。用橡胶塞堵住出水口(保证气压的不一致,确保机器能够运行),然后加入溶液,开启过滤。注意,抽滤漏斗上下容量各ml,所以如果溶液总量大于ml,分多次过滤,不要加多哦。因为加多会溢出来??。过滤好后倒入细胞电生理外液的瓶子。然后完事后注意卫生(仪器清洗)。

5.仪器清洗

操作

先自来水加洗洁精冲洗仪器。注:洗洁精一定要少量,不然泡泡会很多。再用三蒸水冲洗,最后放入烘箱。

还有一件事!!!

再进行细胞电生理之前,我们还要做另外一件事,就是拉电极。拉电极是干什么用的?是为了把一根管一样,圆柱形的电极用高温融成两段。被溶断的那一端会变得极为尖利,利于进行细胞层面的操作。

具体操作:

拿出电极,把电极放入左边的凹槽便于固定,然后固定??。之后左右两边同时推向中间,再把右边固定。最后,盖上仪器的盖子,按Pull键加热,熔断电极。由于电极中间被加热时会液化,在液化的瞬间,由于左右两边凹槽都装有弹簧,电极会在中间被融化的瞬间被拽开(可以想象一下“五马分尸”??)。拽开后,一根电极变成两根,被拽开的中点会呈现为针状(固体被拽开会呈锯齿状;液体被拽开时,由于液体的附着性,中间会发生我们通俗所说的拉丝。降温后,电极凝固,成为针状)。

完成之后,把电极收集起来,之后做电生理的时候会用到。

其实还有一件事

电极在被熔断时是横着放的,由于重力原因,中间我们所需要的针状部位会有一定程度的弯曲,whichisnotsuitableforourexperimentlater(放洋屁)。

所以我们需要对其进行抛光(使电极尖端融化后迅速凝固,reshapeit)。打开收纳盒,拿出一根熔断后的电极,卡进抛光器。

用低倍镜观察,找到铁丝和电极。将带有电极的机械臂下调至铁丝上方大概5cm。换高倍镜观察,细心找到电极和铁丝。使电极和铁丝中间垂直。按下开关。抛光结束。

结束完后,把reshaped的电极放回收纳盒,之后做电生理的时候会用到。

这些就是我们在这次试验中学习到的,希望您能够不论是从三蒸水,或是抛光器还是PH值能够被引起兴趣,学到新的小知识~还有最后一件事!如果您觉得这篇文章有趣且有所收获,希望能够得到您的


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